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    酵母重组表达门冬胰岛素的制备方法。本发明公开了一种毕赤酵母重组表达门冬胰岛素的制备方法。具体包括在酵母中高效分泌表达重组人门冬胰岛素原、赖氨酰内肽酶单一酶切获得缺失B30的门冬胰岛素、偶联苏氨酸酯、脱保护、反相纯化及结晶的工艺过程。本发明方法更适合重组门冬胰岛素工业化制备。